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      如何驗證連蓋八連管與儀器的適配性?

      更新時間:2025-05-16    點擊次數:1044

        如何驗證連蓋八連管與儀器的適配性?

      以下是驗證連蓋八連管(0.1ml/0.2ml)與PCR儀器適配性的標準化流程:

      一、物理適配性檢測

      尺寸匹配測試‌

      將八連管插入儀器加熱模塊,觀察是否貼合無松動

      檢查管蓋閉合狀態是否影響儀器熱蓋壓合(尤其矮管設計)

      密封性驗證‌

      加入50μL染色水溶液,運行空載PCR程序后檢查液體蒸發量(應<5%)

      熒光定量實驗需額外測試管蓋透光性(平蓋光損失率需<1%)

       

       


      二、熱力學性能測試

      溫度均一性檢測‌

      使用熱電偶測量各孔實際溫度,與設定值偏差應≤0.3℃

      推薦程序:95℃ 30秒→60℃ 30秒(循環5次)

      升降溫速率驗證‌

      薄壁管(0.1ml)在ABI 7500上應達到4℃/秒升溫速率

      Roche 480需確認管壁厚度≤0.2mm

      三、功能實驗驗證

      標準品擴增測試‌

      使用λDNA梯度稀釋樣本(10?-10?拷貝/μL)進行qPCR,Ct值CV應<2%

      熒光兼容性測試‌

      白色管需驗證FAM/HEX通道信號強度提升≥15%(對比透明管)

      透明管需檢測自發熒光背景值(OD450應<0.05)

      四、適配性記錄表

      檢測項目 合格標準 備注

      物理匹配度 無卡頓/漏液 需測試8連管整體插入

      溫度均一性 孔間溫差≤0.5℃ 建議使用第三方校準儀

      擴增效率 90-110% 使用標準曲線驗證

      (注:不同品牌儀器可能存在特異性要求,如Roche 480需專用矮管設計)以上資料僅供參考,具體請咨詢技術老師及供應商。

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